外泌体是细胞间通信的重要载体,作为机体天然信息传递的工具,发挥着关键作用。蛋白质是外泌体的重要组成成分,对外泌体的蛋白质组成进行分析,可以有效推动外泌体功能研究的发展。基于质谱的蛋白质组学技术为外泌体的蛋白质构成提供了强有力的技术支持。全面研究外泌体的蛋白质,有助于揭示外泌体及其蛋白质在生命活动中的重要功能,并可能帮助识别与疾病相关的蛋白质,进而为疾病的早期诊断和预后评估提供生物标志物。
尊龙凯时-人生就是博为您提供外泌体非标记定量蛋白组学(如DIA、Labelfree)和同位素标记定量蛋白组学(如SILAC、iTRAQ、TMT)等一系列专业服务。
同位素标记定量蛋白组学
iTRAQ(isobaric tagging for multiplexed relative and absolute protein quantitation)和TMT(tandem mass tag)是当前广泛应用的蛋白质定量方法之一。这两种方法原理相似,均属于化学体外标记技术。虽然它们的生产厂家不同(iTRAQ由ABSciex生产,而TMT由ThermoFisher生产),但它们在标记的规格和标签分子结构上存在差异。这两种方法能够有效检测低丰度的蛋白、胞外蛋白、膜蛋白、胞浆蛋白以及核蛋白,并可同时处理多个样本,得到准确的鉴定和定量结果,适用于比较蛋白组分析及差异蛋白的识别。
SILAC技术
SILAC(Stable Isotope Labeling by Amino Acids in Cell Culture)的基本原理是通过细胞培养,利用天然同位素(轻型)或稳定同位素(中型/重型)对相应氨基酸进行替换。经过5至6次传代后,稳定同位素即可完全掺入新合成的蛋白质中。不同标记的细胞或蛋白混合后,通过质谱鉴定进行分析。如果峰值呈1:1,说明该蛋白含量无明显差异;若重型氨基酸标记的峰值偏高,则表明该组中该蛋白浓度增加。SILAC的优点在于标记效率高,灵敏性强,能够检测低丰度蛋白的数量变化及翻译后修饰,且只需少量样本(每个样本仅需几十微克)。但该方法的缺点是耗时较长。
非标记定量蛋白组学
Labelfree非标记(Labelfree)蛋白质定量技术利用液质联用技术将蛋白质酶解成多肽,然后进行质谱分析。此方法通过计算蛋白肽段的鉴定数量和色谱峰面积来进行相对定量,其优点在于无需使用昂贵的标签作为内标,且样本制备过程相对简单,减少了人为和系统误差。然而,与标记定量相比,数据分析相对复杂且重复性较差,对仪器的稳定性和重复性要求较高。通过在样本中添加已知含量的标准蛋白,还可以实现绝对定量。
DIA技术
DIA(Data Independent Acquisition)为一种近年来备受关注的质谱采集技术,作为非标记技术,DIA的原理在于在质谱数据采集时,以高速、循环的方式全面扫描每个采集窗口内的所有母离子及其碎裂后的子离子,而非按母离子信号强度筛选后再进行二级碎片的扫描。DIA技术相较于传统的Labelfree定量方法,有着显著优势,能够高效测定复杂样品中相对低丰度的蛋白分子,极大地提高定量分析的可靠性。
服务流程
我们欢迎客户提交多种生物流体样本,如血清、血浆、脑脊液、尿液、胸水、腹水、唾液、细胞上清、植物样本及其他特殊样本,也可提供已提取好的外泌体。送样时,请根据后续研究目的和方法进行样本的前处理。
关于尊龙凯时-人生就是博,我们是一家致力于开发外泌体精确诊疗产品的创新型生物科技公司,凭借质谱技术的驱动不断推陈出新。公司目前已经成功开发出多种技术平台,涵盖血液循环蛋白标志物的发现与诊断、功能性外泌体原料的规模化生产、纯化及质控等多个领域。此外,我们还提供外泌体相关的科研产品及解决方案,现有货架产品超过50种,包罗外泌体检测、保存及递送等多个方面。
我们为行业发展作出了不懈努力,申请了多项国家发明专利和实用新型专利,成果也多次发表在国际知名期刊上。