凝血功能紊乱被认为是COVID-19致病性的关键因素之一，但目前关于细胞外囊泡（EVs）和残留细胞（RCs）在此过程中的作用研究还较为有限。通过Apogeeflow纳米流式细胞仪，我们能够分析EVs中CD61、CD235a、CD45和CD31的含量，从而检测血小板、红细胞、白细胞和内皮细胞的参与情况。同时，通过乳酸粘附素的结合检验磷脂酰丝氨酸EVs/RCs，进而确认其作为促凝剂的催化作用。未考虑细胞来源的D-二聚体增高的患者，观察到最高水平的RCs和sEVs数量。血小板的活化程度通过CD61+和乳酸粘附素+mEV及RCs的升高与凝血障碍密切相关。而且，在D-二聚体水平较低的患者中，通过CD41a+sEVs的四跨蛋白特征可与对照组清晰区分，提示在COVID-19感染期间循环血小板sEVs亚群的变化可能具有一定的预后价值。

研究背景与目的：严重的COVID-19感染往往伴随着频繁的凝血和止血障碍，实验室检查常见结果包括血浆D-二聚体和纤维蛋白原水平升高、白细胞增多伴随淋巴细胞减少、血小板增多及贫血。目前关于COVID-19应答对细胞介导止血的影响尚缺乏足够的数据。血小板还通过膜受体直接与病原体相互作用，参与到免疫反应中。活化的血小板释放的异质性细胞外囊泡（EVs）被认为在炎症和凝血反应中起了重要参与作用。研究发现，在COVID-19阳性的住院患者中，血小板源性抗体的数量相比COVID-19阴性患者有显著升高。

ApogeeFlow纳米流式细胞仪的应用：ApogeeFlow纳米流式细胞仪是一种先进的细胞分析技术，专门用于微小颗粒和细胞外囊泡的检测。该仪器结合了高灵敏度的散射光与荧光检测系统，具备精确的流体控制，能高效提供颗粒分析与细胞分型。

检测精度与优势：ApogeeFlow纳米流式细胞仪在EVs检测中的优势主要体现在几个方面：首先，它可检测至纳米级别的颗粒，满足小范围EVs的检测需求；其次，提供多参数分析，能够同时检测EVs的大小、形状、表面标记物及内部成分；最后，该设备还具备高通量检测的能力，可快速处理大量样本，提升研究效率。

实验结果：通过流式细胞术分析EV时，经过适当抗体孵育后，各样本在ApogeeFlow系统上测量，以确保计数率在1000至4000之间。实验结果表明，在高D-二聚体组样本中，CD61、CD235、CD31、CD45和乳酸粘附素阳性EVs/RCs的水平均高于低D-二聚体组与对照组之间的差异。

结论：ApogeeFlow纳米流式细胞仪在COVID-19的研究中扮演着至关重要的角色。它不仅能够检测并分析血小板微粒的数量和活性变化，揭示血小板在COVID-19病理过程中所起的作用，还能够对其他细胞外囊泡及病毒颗粒进行检测，为深入研究COVID-19的病毒感染机制和免疫反应提供了宝贵信息。该仪器的高灵敏度与高分辨率确保能够准确区分各种颗粒，助力疾病的早期诊断与预后评估。

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